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임상 현미경 분야의 핵심 도구인 HPF 계수
서론
임상 전문가와 병리학자들은 빠른 속도, 간편함, 진단 활용을 위해 고배율 시야(high-power field, HPF) 계수에 의존합니다. 이 방법은 고배율에서 세포와 구조를 빠르고 표준화된 방식으로 평가하므로 신장학, 병리학, 미생물학과 같은 분야의 의사 결정을 직접적으로 지원합니다.
HPF 계수는 최소한의 장비를 필요로 하고 즉시 결과를 제공하므로 디지털 도구가 발전되고 있음에도 불구하고 의학적 지침과 일상적인 실험실 관행에 필수적인 도구입니다.
계수 오류 최소화
대부분의 진단 임계값은 표준 현미경의 시야수(FN) 22를 기준으로 합니다. 이 시야수는 400배율에서 대략 0.237mm²의 HPF 면적을 정의합니다.
다른 시야수를 가진 현미경을 사용할 경우 실제 HPF 면적은 달라집니다. 이러한 변동성 때문에 다음 보정 방법 중 하나를 적용하지 않으면 전체적으로 과다계수나 과소계수가 발생할 수 있습니다.
- 보정 계수 적용 - 표준 HPF 면적(FN22)에 맞게 관찰된 카운트를 수학적으로 조정합니다.
- 계수된 HPF의 수 조정 - 표준 FN22 HPF에 해당하는 총 면적과 일치하도록 더 많은 필드를 계수하거나 더 적은 필드를 계수합니다.
그림 1. 시야수는 대안렌즈에 적혀 있습니다. 이 예에서는 FN26.5입니다.
표 1. 시야수별 보정 방법
시야수 선택 최적화
큰 FN을 사용하면 실질적 장점이 있습니다. FN26.5를 사용하면 FN22를 적용하여10 HPF와 동일한 면적을 관찰하는 데 7 HPF만 필요합니다. 이 시점에서 이미 진단을 위한 유의미한 결과를 얻은 경우 계수를 중단하세요. 결과가 경계선에 있으면 10 HPF까지 계속 진행하고 보간 보정 계수를 적용하세요. FN22를 사용할 때보다 슬라이드 면적을 31% 더 평가하게 되므로 진단을 확정할 때 통계적 장점이 있습니다.
22보다 낮은 FN을 사용할 경우, 표 1에 따라 계수된 HPF 수를 높일 것을 권장합니다. 외삽 보정 계수를 사용하면 오류가 발생할 위험이 높기 때문입니다. 특히 세포 분포가 불균일한 샘플에서 그러합니다.
그림 2. 얇은 세포 층. 20배율에서 FN18, FN22 및 FN26.5의 시야.
결론
임상 현미경에서 디지털 이미징과 자동 분석이 점점 더 지배적으로 사용되고 있지만, HPF 계수는 신뢰성, 접근성, 진단 관련성 때문에 중요한 기초적 기법으로 남아 있습니다. 특히 표준 FN22를 벗어나는 경우 정확도를 유지하려면 현미경 시야수가 HPF 면적에 끼치는 영향을 반드시 이해해야 합니다.
보정 계수를 적용하거나 계수되는 시야수를 조정하면 임상 전문가는 일관적이고 의미 있는 결과를 얻을 수 있습니다. 큰 FN을 사용할 경우 효율성과 통계적 장점을 제공하며, 작은 FN은 샘플링 편향을 방지하기 위해 세심하게 보정해야 합니다. 궁극적으로, 이러한 조정 방법에 숙달되면 현대 진단 워크플로의 강력하고 조정 가능한 도구인 HPF 계수를 더욱 향상시킬 수 있습니다.