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HPF计数仍是临床显微镜检查的核心工具

简介

临床医生与病理学家始终青睐高倍视场(HPF)计数技术,因其高效快捷、操作简便且具有重要诊断价值。该技术能够实现高倍镜下的快速标准化细胞与组织结构评估,为肾脏病学、病理学及微生物学等领域的临床决策提供直接支持。

即便数字化工具不断发展,HPF计数法所需设备极少且能即时得出结果,因此始终是医疗指南和日常实验室实践的重要组成部分。

尽可能减少计数错误

大多数诊断阈值基于标准显微镜视场数(FN)22,该数值在400倍放大条件下对应约0.237 mm²的HPF面积。

当使用具有不同FN的显微镜时,实际HPF面积会发生变化。若未采用下列任一校正方法,这种差异可能导致系统性的计数偏高或偏低:

  1. 应用校正因子 - 通过数学方法调整观测计数,使其与标准HPF面积相匹配(FN22)。
  2. 调整计数的HPF数量 - 增减计数的高倍视场数量,使其总面积等同于标准FN22 HPF的总面积。

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图1. 目镜上标注着视场数,如本例中的FN26.5。

表1. 按视场数划分的修正方法

视场数(FN)
HPF面积(mm²)
修正系数(匹配FN22)
要计数的HPF(等于10个FN22 HPF)
FN18
0.159
× 1.49
15个HPF
FN20
0.196
× 1.21
12个HPF
FN22(标准)
0.237
× 1.00(无调整)
10个HPF
FN26.5
0.344 × 0.69
× 0.69
7个HPF

优化视场数选择

使用更大视场数具有实际优势。采用FN26.5视场时,仅需7个HPF即可覆盖相当于FN22视场下10个HPF的观测面积。若此时结果已具诊断意义,则停止计数。若结果处于临界状态,则继续计数至10个HPF并应用内插校正因子。相较于FN22,此方法可增加31%的玻片评估面积,这在确诊时具有统计学优势。

当FN值小于22时,建议参照表1增加HPF计数数量,因采用外插校正因子易引入误差—尤其在细胞分布不均的样本中。

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图2. 薄层细胞。适用于FN18、FN22及FN26.5目镜的20倍放大倍率视场。

结语

尽管数字成像和自动化分析在临床显微镜检查中的应用日益广泛,但HPF计数仍因其可靠性、便捷性及诊断相关性而成为基础技术。理解显微镜视场数对HPF面积的影响对于维持准确性至关重要,尤其在偏离标准视场数FN22时。

通过应用校正因子或调整计数视场数,临床医生可确保结果的一致性和有效性。较大的FN能提升效率与统计学优势,而较小的FN则需谨慎补偿以避免采样偏差。最终,掌握这些调整技巧将巩固HPF计数作为现代诊断工作流程中可靠且灵活工具的地位。