Microscope confocal à balayage laser FLUOVIEW FV4000

Transformez vos images avec le nouveau microscope confocal à balayage laser FLUOVIEW™ FV4000. La technologie d’imagerie avancée permet l’acquisition d’images de plus grande précision, ce qui permet aux chercheurs d’obtenir des données plus fiables à partir de leurs échantillons. Avec notre détecteur révolutionnaire SilVIR™ au cœur du système, il est possible de profiter d’un bruit beaucoup plus faible, d’une sensibilité plus élevée et de capacités de résolution photonique améliorées. Avec le microscope confocal FV4000, les chercheurs peuvent acquérir des données d’image quantitatives de meilleure qualité en moins de temps et plus facilement.

  • Product Status: Ce produit et les anciens systèmes de la série FV ont été remplacés par le FV5000.

FV4000 Microscope confocal à balayage laser

Une véritable transformation pour l’imagerie de précision

Notre expertise de plus de 100 ans dans le domaine de l’optique a mené à la conception du microscope FV4000, une avancée technologique qui offre une qualité d’image exceptionnelle avec le potentiel de changer ce que vous pouvez voir et d’améliorer vos recherches.

  • Bénéficiez d’une qualité d’image supérieure avec notre détecteur SilVIR™ à très faible niveau de bruit et six canaux, dix lignes laser et une étendue dynamique de 400 à 900 nm à la pointe de l’industrie*.
  • Acquérez des images confocales jusqu’à 60 fois plus rapidement et des images en super-résolution jusqu’à 8 fois plus rapidement que le FV3000.
  • Comptez le nombre de photons dans chaque pixel et représentez les caractéristiques sous forme d’histogrammes discrets de photons captés à différentes longueurs d’onde.
  • L’étendue dynamique révolutionnaire permet de compter de quelques photons à des milliers avec linéarité, une première en microscopie confocale.
  • Il est facile à utiliser, avec des réglages minimaux pour obtenir des images et des données d’une grande portée.

    * En date d’octobre 2023.

Voir les brochures

« Les détecteurs sont faciles à régler grâce à leur plage dynamique étendue. Ils peuvent détecter aussi bien des signaux faibles que des signaux intenses. Cela rend le réglage de ce microscope très simple et intuitif. Le mode de comptage des photons est une fonction extrêmement utile. Grâce à sa haute précision, ses réglages simples et sa grande flexibilité, le microscope FV4000 est un outil précieux pour les services d’imagerie, quels que soient les différents niveaux d’expérience de leurs utilisateurs ou la complexité de leurs expériences d’imagerie. »

Johannes Riemann | Center for Microscopy and Image Analysis, Université de Zurich

https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/mis/fv4000/media/videos/FV4000_Product_Ovewview_Video_Final.mp4

Technologie révolutionnaire de détection SilVIR™ : la nouvelle référence absolue

Notre détecteur SilVIR™ avancé à base de silicium facilite plus que jamais l’acquisition de données précises et reproductibles.

Le détecteur combine deux technologies avancées : un photomultiplicateur au silicium (SiPM) et notre système breveté* de traitement rapide des signaux.

  • La détection hautement dynamique permet au système d’acquérir des signaux de fluorescence faibles et forts dans une même image avec une bonne linéarité et de quantifier le nombre de photons pour une analyse d’image optimale.
  • La plus large plage de longueurs d’onde de détection spectrale disponible sur le marché (de 400 à 900 nm) vous permet d’utiliser des fluorophores émettant du visible au proche infrarouge et d’obtenir des données avec une efficacité spectrale élevée**.
  • Le très faible niveau de bruit se traduit par des arrière-plans ultrasombres, de sorte que même les fluorescences très faibles se distinguent.
  • Contrairement aux anciennes technologies de détection, la sensibilité du détecteur SilVIR demeure constante au fil du temps, ce qui permet d’obtenir des données expérimentales cohérentes et reproductibles.

* Brevet n° US11237047

* En date d’octobre 2023.

En savoir plus sur le détecteur SilVIR

Image assemblée d’un cerveau 40x

Chaîne lourde de neurofilament (NFH) en vert, protéine basique de la myéline (MBP) en rouge, glutathion S-transférase pi 1 (GSTpi) en bleu. Image d’un cervelet de souris prise avec un objectif UPLXAPO40X.
Échantillon gracieusement fourni par Katherine Given, Ph.D., chercheuse principale, Neurobiology University of Colorado Anschutz Medical Campus, Aurora, Colorado, États-Unis

Détecteur conventionnel
Détecteur SiLVIR

L’histogramme représenté sur l’image prise à l’aide du détecteur SilVIR présente un profil discret permettant de convertir l’intensité en nombre de photons.
L’intensité de fluorescence du détecteur peut être exprimée en nombre de photons, et le bruit de fond est extrêmement faible.

« Je suis réellement impressionné par ce microscope et ses performances. Sa supersensibilité est vraiment remarquable. »

– Sara R. Roig | Spécialiste en microscopie avancée, Université de Bâle

Plus d’informations extraites de vos images confocales

La technologie TruSpectral mise à jour du système combinée à des détecteurs SilVIR à haute sensibilité vous permet de voir plus de choses grâce à la possibilité de multiplexer jusqu’à six canaux simultanément.

Assemblage A01 GOO1 Projection Z

Unité neurovasculaire d’un hippocampe de souris. Bleu ; DAPI (noyaux cellulaires), vert ; GFAP AF488. (astrocytes), jaune ; DsRED (Péricytes), magenta ; IV AF647 (collagène de la membrane basale des vaisseaux sanguins), gris ; AQ-4. aquaporines d’astrocytes.
Échantillon gracieusement fourni par : Hiroshi Hama et Atsushi Miyawaki, Cell Function Dynamics, RIKEN CBS.

Cellule à quatre couleurs de cytosquelette

Échantillon de cytosquelette. Cellules HeLa marquées au DAPI (bleu), avec de la péricentrine (centrosome, vert), de l’alpha-tubuline (microtubules, Alexa-568 ; rouge) et de la phalloïdine (actine, Alexa-647 ; magenta).
Échantillon gracieusement fourni par : Alexia Ferrand (préparation des échantillons) ; Sara R. Roig et Alexia Ferrand (acquisition des échantillons). Imaging Core Facility, Biozentrum, Université de Bâle.

Adaptation facile aux besoins changeants en matière de recherche

Vue d’ensemble d’une aile de drosophile
Image du bord d’une aile de drosophile

Vue d’ensemble et bord d’une aile de drosophile (après 42 heures de pupaison). Marquée avec de la phalloïdine (AlexaFluor 405, F-actine, Cyan), des anticorps antiphosphotyrosine (AlexaFluor 555, surface cellulaire, rouge) et des anticorps anti-HRP (AlexaFluor 647, axone, bleu). Échantillon gracieusement fourni par : Sun Zhengkuan, Shigeo Hayashi, Laboratory for Morphogenetic Signaling, RIKEN Center for Biosystems Dynamics Research, Japon.

Une imagerie à intervalles à grande vitesse moins destructrice

https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/video/video/library/_7_1.mp4

Cellules HeLa marquées au MitoView 720.
Imagerie XYZT par scanner résonnant 1K pendant 30 min.

La réalisation d’une imagerie à intervalles est plus facile grâce aux fonctions intelligentes :

  • Capturez chaque instant de la dynamique des cellules vivantes – Le scanner résonnant peut acquérir des images à haute résolution sur une grande surface.
  • Une phototoxicité minimale – Le court temps de séjour des pixels du scanner réduit le temps pendant lequel le faisceau laser reste focalisé sur un même point.
  • Un rapport signal sur bruit amélioré – La haute sensibilité du détecteur SilVIR produit des images de meilleure qualité à des vitesses plus grandes.
  • Une plus grande précision – Le traitement par moyenne mobile préserve les quantifications et la résolution temporelle.

Des données d’image reproductibles d’un utilisateur à l’autre et d’un système à l’autre

Le détecteur SilVIR présente moins de perte de sensibilité au fil du temps que les technologies de détection de la génération précédente. Avec notre moniteur de puissance du laser (LPM) et notre compensateur de dérive Z TruFocus™, réalisez des images reproductibles dans des conditions invariables pour une meilleure reproductibilité. Différents utilisateurs, sur différents jours, peuvent acquérir les mêmes images précises en utilisant les mêmes réglages. Même les images acquises par différents microscopes FV4000 peuvent être comparées et analysées en utilisant la même échelle d’intensité en nombre de photons.

Pour améliorer davantage la reproductibilité, le moniteur des performances des microscopes facilite la vérification de la puissance du laser, de la sensibilité de détection et des performances optiques du système, contribuant ainsi à s’assurer que votre microscope FV4000 fonctionne à un niveau constant et élevé.

Favoriser l’avenir de la recherche en imagerie de pointe

Nous avons conçu le microscope FV4000 à l'intention de tous ses utilisateurs, du responsable de service d’imagerie aux utilisateurs individuels assis devant le microscope et réalisant des expériences d’imagerie.

Responsables de service d’imagerie

Responsables de groupe et chercheurs principaux

Utilisateurs individuels

Une assistance et un service fiable pour les microscopes

Nous avons conçu le système FV4000 pour qu’il soit facile à entretenir :

Nous répondons de nos produits et nous engageons à assurer une maintenance et une assistance technique rapide pour aider nos clients à atteindre leurs objectifs. Nous proposons divers forfaits d’assistance pour que votre microscope fonctionne à un niveau de performance optimal à un coût prévisible, ainsi qu’un service d’assistance à distance en option, de sorte que vous n’avez pas besoin d’attendre l’intervention d’un technicien ou d’un spécialiste en cas de problème.

« Comparativement à d’autres microscopes confocaux, j’ai pu utiliser celui-ci sans stress : aucune crainte de détériorer l’échantillon observé ne m’a effleuré l’esprit, et j’ai aisément maîtrisé l’utilisation du microscope et du logiciel qui l’accompagne. De plus, ce microscope nécessite très peu de réglages de la part l’utilisateur pour produire des données de haute qualité, mais ne limite pas pour autant les options de travail. »

– Sanni Erämies, Université de Tampere, Imaging Facility Tampere

Une assistance et un service fiable pour les microscopes

Technologies appliquées

En voir plus avec la microscopie confocale proche infrarouge

Les technologies améliorées du système ont permis un multiplexage étendu pour voir plus de choses dans une même image.

L’imagerie proche infrarouge (NIR) offre de meilleures capacités de multiplexage en étendant le profil spectral d’excitation (λ_Ex) et de détection (λ_Em) du système FV4000. Cela permet d’utiliser des fluorophores supplémentaires pour réduire au minimum le chevauchement des signaux d’émission.

* En date de mars 2023.

Cell nuclei (DAPI; blue) cell membrane (AF488; green) nuclear pore (AF561; yellow)
microtubule (Qdot605; magenta) mitochondria (MitoTracker DeepRed; cyan) actin (AF750 phalloidin; gray)

HeLa cells labeled by 6 fluorochromes.

HeLa cells labeled by 6 fluorochromes.
Cell nuclei (DAPI; blue), cell membrane (AF488; green), nuclear pore (AF561; yellow),
microtubule (Qdot605; magenta), mitochondria (MitoTracker DeepRed; cyan), actin (AF750 phalloidin; gray).

Une technologie primée pour des recherches primées

Les éléments optiques du système FV4000 présentent une transmission élevée de 400 à 1300 nm, notamment le scanner galvanométrique et le scanner résonnant, qui sont revêtus d’argent au lieu du revêtement d’aluminium habituel.

Nos objectifs objectifs X Line™ primés sont corrigés pour les aberrations chromatiques entre 400 et 1000 nm. Ils ont également une ouverture numérique plus grande, une excellente planéité et une transmittance très élevée de l’UV au NIR, ce qui augmente les capacités de multiplexage.

Pour une meilleure fiabilité des colocalisations, notre objectif spécialisé à immersion dans l’huile A Line™ (PLAPON60XOSC2) (ne~1,40) réduit considérablement les aberrations chromatiques pour une analyse stricte des colocalisations.

X Series

Des images de meilleure qualité jusqu’à 60 fois plus rapidement qu’avec le FV3000

Une combinaison de technologies unique produit des images de haute qualité 60 fois plus rapidement que le microscope FV3000.

  • Des images haute en résolution prises à grande vitesse : le scanner résonnant 1K × 1K à FN20 avec 0,033 µs par pixel libère toute la puissance du multiplexage et permet d’acquérir rapidement des images macro assemblées.
  • Des images macro de qualité exceptionnelle : les images prises avec le scanner résonant et le détecteur SilVIR vous permettent de créer des images assemblées en haute résolution en peu de temps et avec une qualité d’image exceptionnelle.

« Associé aux outils de restauration par l’IA, il offre une combinaison parfaite pour l’imagerie volumétrique rapide et de haute qualité. »

– Edwin Hernandez | Responsable du service d’imagerie, Cajal International Neuroscience Center (CINC)

Des images d’un total de 77 positions XYZ à quatre canaux (11 × 7) ont été acquises à l’aide d’un scanner résonnant 1K en 16 minutes pour créer l’image assemblée, ce qui aurait auparavant nécessité 2 heures avec un scanner galvanométrique. Coupe coronale d’un cerveau de souris de lignée H, cyan ; DAPI (noyaux cellulaires), vert ; YFP (neurone), jaune ; cy3 (astrocytes), magenta ; AlexaFluor 750 (microtubule). Échantillon gracieusement fourni par : Takako Kogure et Atsushi Miyawaki, Cell Function Dynamics, RIKEN CBS.

Une imagerie à super-résolution huit fois plus rapide*

Le microscope FV4000 vous permet de prendre des images macro à micro et en super-résolution, sans matériel supplémentaire.

  • Simple : observez facilement les structures subcellulaires à l’aide de nos objectifs A Line HR et de notre logiciel de super-résolution (FV-OSR).
  • Détaillée : le logiciel optimise automatiquement l’ouverture confocale pour détecter les composantes à haute fréquence et améliore leur contraste jusqu’à une résolution de 120 nm.
  • Rapide : prenez des images en super-résolution huit fois plus rapidement qu’avec les systèmes de la génération précédente grâce au très faible bruit du détecteur SilVIR.

* Comparé au FV3000.

Comparaison du mode confocal 1AU (d'abord) et du mode super-résolution (seconde)

Obtenez des informations plus en profondeur grâce à l’imagerie 3D à haute résolution

https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/video/video/library/D02-DAPI_Ki67AF790_ex785_em792lp_A01_G003_0001(2).mp4

Sphéroïde de cellule HeLa marqué au DAPI (cyan, noyaux cellulaires) et à l’AlexaFluor790 (magenta, Ki-67). L’imagerie du volume entier du sphéroïde a été rendue possible par l’utilisation du proche infrarouge à 785 nm, alors que seule l’observation des noyaux des cellules à la surface du sphéroïde était possible avec un laser de 405 nm.

Prenez rapidement et facilement des images 3D à haute résolution d’échantillons épais

Maximisez la profondeur, le temps et la qualité d’image

  • Pénétrez plus profondément dans les tissus grâce à la longueur d’onde plus grande du proche infrarouge et à la large étendue dynamique et à la sensibilité du détecteur SilVIR.
  • Prenez des images plus profondément dans les tissus avec moins de diffusion et d’absorption, les composés diffusant la lumière, comme la mélanine et l’hème, absorbant moins de lumière entre 700 et 1500 nm.
  • Prenez des images plus profondément que ce qui serait possible avec les lasers visibles grâce aux lasers à diodes de 685, 730 et 785 nm sur le FV4000.
  • Les objectifs à immersion dans l’huile de silicone et grande ouverture numérique réduisent au minimum les aberrations sphériques
  • L’huile de silicone ne sèche pas à température ambiante, ce qui permet de mener des expériences d’imagerie à intervalles plus efficaces.
  • Prenez de superbes images 3D d’échantillons épais à l’aide de la déconvolution TruSight™.

La dynamique précise des cellules vivantes avec moins de photodommages

De façon générale, il est préférable pour la viabilité générale de l’échantillon d’utiliser des grandes longueurs d’onde pour l’excitation de fluorescence pendant des durées les plus courtes possible. En utilisant moins de lumière phototoxique, on peut prendre des images sur de plus longues périodes, ce qui permet d’obtenir des données plus cohérentes et plus reproductibles à partir d’expériences d’imagerie de cellules vivantes.

Le système FV4000 assure non seulement une imagerie à intervalles non destructrice grâce aux lasers à 685, 730 et 785 nm, mais il est également doté d’un compensateur de dérive Z TruFocus Red dédié pour maintenir la position de mise au point. Cette unité TruFocus Red améliorée prend en charge une plus grande plage de longueurs d’onde et est compatible avec une large gamme d’objectifs, notamment nos séries à hautes performances X Line™ et A Line™.

« Le nouveau FV4000 permettra de prendre des images plus rapidement tout en assurant une meilleure préservation de l’échantillon et une meilleure reproductibilité. »

– Alexia Ferrand | Spécialiste en microscopie avancée, Université de Bâle

https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/video/video/library/TruFocus_Z-Drift_Compensator_480.mp4

https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/video/video/library/_7_2.mp4

Photostimulation en imagerie à intervalles : la lésion au laser a été réalisée sur des cellules C2C12. La pseudo-couleur verte représente l’application d’un bain de FM 1-43. L’image a été acquise avec un scanner galvanométrique de 2 μs et un objectif UPLSAPO60XOHR. Un laser de 405 nm a été utilisé pour la photolésion et un laser de 488 nm a été utilisé pour l’imagerie. Échantillon gracieusement fourni par : Daniel Bittel et Jyoti Jaiswal, Center for Genetic Medicine Research, Children’s National Research Institute.

https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/video/video/library/_7_3.mp4

Images à intervalles de cellules HeLa marquées à l’Hoechst33342 (noyaux, bleu), MitoTracker Green (mitochondrie, vert), LysoTracker Red (lysosome, jaune), SiR-Tubulin (tubuline, magenta), POR-SA-Halo (ER, cyan). Hoechst33342 : Ex 405 nm/Em, MitoTracker Green : LysoTrakcer Red : SiR-Tubulin : POR-SA-Halo. Échantillon gracieusement fourni par : Masayasu Taki, Ph.D., Institute of Transformative Bio-Molecules (WPI-ITbM), université de Nagoya, Japon, et Yuichi Asada et Ryusei Aruga, Graduate School of Science, université de Nagoya, Japon.

https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/video/video/library/_7_4.mp4

Série d’images prises à intervalles sur 17 heures de cellules HeLa marquées avec du MitoTracker Red (mitochondries, magenta), POR-SA-Halo (ER, cyan). MitoTracker Red : Ex 561 nm/Em, POR-SA-Halo : Ex 730 nm/Em. Échantillon gracieusement fourni par : Masayasu Taki, Ph.D., Institute of Transformative Bio-Molecules (WPI-ITbM), université de Nagoya, Japon, et Yuichi Asada et Ryusei Aruga, Graduate School of Science, université de Nagoya, Japon.

Des images des couches profondes d’une grande clarté

Utilisez nos objectifs à immersion dans l’huile de silicone avec le microscope FV4000 et réalisez des images claires des caractéristiques et des structures d’intérêt au plus profond de votre échantillon. L’huile de silicone a un indice de réfraction proche de celui des cellules vivantes ou des tissus, ce qui réduit considérablement l’aberration sphérique par rapport à l’air, à l’eau ou à d’autres huiles. Avec moins d’aberrations, il est possible d’obtenir des couches profondes de votre échantillon. En outre, l’huile d’immersion de silicone ne sèche pas à 37 ℃ (98,6 °F), ce qui la rend efficace pour l’imagerie à intervalles de longue durée.

https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/video/video/library/Silicone_Objectives_withVO(4).mp4

Solutions d’IA pour la microscopie confocale

Des images spectaculaires et riches en données en moins de temps et avec moins d’efforts

Obtenez de meilleures images en moins de temps et avec moins d’efforts. La technologie de débruitage TruAI™ réduit à des niveaux ultrabas le bruit déjà très faible des images prises avec le FV4000 pour produire des images spectaculaires et riches en données.

Pour accélérer l’analyse des images, il est possible de pré-entraîner un modèle d’IA afin que le système soit capable de segmenter automatiquement vos données d’image, ce qui réduit considérablement la charge de travail liée à ce processus souvent fastidieux lorsqu’il est effectué manuellement. La technologie TruAI simplifie ensuite davantage l’analyse pour vous permettre d’obtenir vos données rapidement.

L’innovation au service de l’excellence en imagerie

Améliorez la qualité d’image de votre scanner résonnant en intégrant la réduction du bruit TruAI. Bien que les images réalisées avec le scanner résonnant soient efficaces pour capter la dynamique cellulaire à de grandes vitesses avec de faibles dommages pour les échantillons, cela entraîne généralement un compromis concernant le rapport signal/bruit. La réduction du bruit TruAI peut améliorer ces images sans sacrifier en résolution temporelle grâce à des réseaux neuronaux pré-entraînés basés sur le profil de bruit des détecteurs SilVIR™. Ces algorithmes de réduction du bruit TruAI pré-entraînés peuvent être utilisés pour le traitement à la volée comme pour le post-traitement.

Traitée avec réduction du bruit TruAI (seconde)

Échantillon de cerveau : coupe coronale (50 μm) d’un cerveau de souris marquée au DAPI (noyaux, cyan) et avec GFAP (astrocytes, vert/488), MAP2 (protéine associée aux microtubules 2, neurones et processus dendritiques, cyan/647) et MBP (protéine basique de la myéline, rouge/568). Échantillon gracieusement fourni par : Alexia Ferrand (préparation de l’échantillon) ; Acquisition des échantillons : Sara R. Roig et Alexia Ferrand (acquisition de l’image de l’échantillon). Imaging Core Facility, Biozentrum, Université de Bâle.

Traitée avec réduction du bruit TruAI (seconde)

Images de mitochondries de cellules HeLa marquées au MitoView 720 acquises à l’aide d’un scanner résonnant 1K. Le nombre maximal de photons était de trois photons.

Analyse d’image plus rapide et plus simple

L’analyse des images nécessite l’extraction des données à l’aide de techniques de segmentation reposant sur des seuils de valeur d’intensité. Mais cette façon de travailler peut être chronophage et être influencée par l’état de l’échantillon.

La segmentation des images TruAI à l’aide de l’apprentissage profond permet de rationaliser le traitement des images et de réduire au minimum les variables liées aux échantillons, pour une analyse plus précise des images. Elle permet de segmenter avec des performances supérieures des images d’échantillons avec une fluorescence faible ou de tissus généralement difficiles à extraire à l’aide de la simple méthode de seuillage

La technologie TruAI détecte les caractéristiques des glomérules (seconde).

Configurations

Le microscope FV4000 est conçu pour être modulaire, ce qui vous permet de configurer facilement le système en fonction de vos applications et de votre budget. Vous pouvez commencer avec un FV4000 standard et passer facilement à l’imagerie multiphotonique en ajoutant le module MPE si vos recherches évoluent.

Une plateforme pour vos besoins de recherche

L’imagerie combinée multiphotonique et monophotonique dans un même échantillon est également possible. Le microscope FV4000MPE est capable d’imagerie par génération de deuxième et troisième harmonique. Différents chercheurs ou utilisateurs peuvent ainsi tirer le meilleur parti du système. Si votre recherche nécessite une configuration spécifique, la modularité du microscope et les ports optionnels vous permettent de personnaliser le système pour ajouter des lasers, des caméras, des détecteurs et plus encore.

Mise à niveau vers FV4000MPE

Sélectionnez la configuration la mieux adaptée à votre application

Caractéristiques techniques

Scanner
Scanner galvanométrique
(imagerie normale)
64 × 64 à 4096 × 4096 pixels, 1 μs/pixel–1000 μs/pixel
Scanner résonnant
(imagerie à haute vitesse)
512 × 512 pixels, 1024 × 1024 pixels
Indice de champ (FN)
20
Détecteur confocal spectral
Type de détecteur
Détecteur SilVIR (SiPM refroidi, type large bande/type décalé vers le rouge)
Nombre maximal de canaux
Six canaux
Méthode spectrale
VPH, plage de longueurs d’onde détectables de 400 à 900 nm
Laser
Laser VIS
405, 445, 488, 514, 561, 594, 640 nm
Laser NIR
685, 730, 785 nm
Moniteur de puissance du laser
Intégré
Image
Comptage de photons à plage dynamique étendue (1G cps, 16 bits)

Ressources

Notes d'application

Blogue

Livre blanc

Vidéos

Ressources produit