FLUOVIEW FV3000 현미경을 사용하여 경골 골단의 미세 신경혈관 구조 관찰

광퇴색을 방지함과 동시에 복잡한 미세 조직 구조의 이미지 획득

신경과 혈관이 좁은 영역 내 복잡한 구조를 형성하기 때문에 무릎 관절 골단의 혈관 및 감각 신경의 이미지를 획득하는 것은 어려운 일입니다. 높은 전송 효율 덕분에 FLUOVIEW FV3000 컨포칼 레이저 스캐닝 현미경은 낮은 레이저 파워를 사용하면서 고해상도의 밝은 이미지를 획득할 수 있으며 이를 통해 샘플 내 광퇴색 현상을 줄일 수 있습니다. FV3000 현미경의 이러한 기능을 사용하여 경골 골단의 구멍을 관통하는 감각 신경 및 주위 맥관 구조의 복합 3D 구조의 이미지를 성공적으로 획득할 수 있었습니다.

그림 1: 감각 신경 및 주위 맥관 구조가 경골 골단 구멍을 관통합니다(3D 이미지)
감각 신경(EYFP, 청록색), 혈관(Alexa Fluor 594, 마젠타색), 핵(DAPI, 주황색)

이미징 장비
현미경: FLUOVIEW FV3000 시스템
대물렌즈: 100X 오일 이멀젼 대물렌즈(UPLSAPO100XO)

경골 골단 내 신경혈관 구조의 발견

무릎 관절 쪽 혈관 및 신경 투영을 이해하는 것이 무릎 관절증의 통증을 완화하는 데 중요합니다. 하지만 현재까지 연구원들은 무릎 관절 전체에 걸쳐 감각 신경 및 혈관이 형성하는 미세 구조를 완전히 관찰할 수 없었습니다. FV3000 현미경을 통해 이러한 구조가 처음으로 또렷히 보입니다. 무릎 관절의 감각 신경이 반월판 뿐 아니라 경골 골단에도 존재하는 것이 관찰되었습니다. 이들 감각 신경은 주위 혈관으로 휘감겨 있으며 이와 함께 신경혈관 구조가 경골 골단의 구멍을 관통하고 있습니다.

참고문헌: Koichi Matsuo, et al. “Innervation of the tibial epiphysis through the intercondylar foramen.” Bone, 120 (2019) 297–304

그림 2：신경 및 혈관 구멍

FV3000 컨포칼 현미경에 의한 실험 촉진 방법

고감도 TruSpectral 검출기는 낮은 광독성으로 이미지를 획득합니다

낮은 여기광 하에서 높은 신호 대 잡음비 이미지 획득

Dr. Katsuhiro Kawaai의 견해

감사의 말
이 애플리케이션 노트는 다음 연구원들의 도움으로 작성되었습니다.
Dr. Katsuhiro Kawaai 및 Dr. Koichi Matsuo, 게이오 의과대학 세포 및 조직 기술 실험실