用于TIRF的高分辨率物镜
高数值孔径(NA)对于TIRF显微成像非常重要。作为TIRF成像领域的领军企业,奥林巴斯提供多种规格的高NA系列物镜,NA值从1.45到全球最高的1.7*1 放大倍率从60倍到150倍。现代显微成像方法,例如利用sCMOS相机进行超高分辨大视野成像时,需要高品质物镜。这就是我们研发先进物镜生产技术的原因。这种先进的抛光技术,使得我们能够创造出世界上首款NA为1.5*2 的平场校正复消色差物镜。该系列物镜在大视野下依然能够提供优秀的平场图像,是TIRF成像的理想工具。
*1 根据奥巴斯公司的研究,到2018年11月为止。
*2 根据奥巴斯公司的研究,到2018年11月为止。
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长时程TIRF成像,观察质膜与FBP17蛋白之间的聚合与解聚作用。
利用高数值孔径物镜,调节TIRF成像深度,获得高信噪比图像。
TIRF成像有助于细胞生物学研究。这幅图片展示了细胞膜形态和分子动力学的变化。物镜:UAPON100XOTIRF。*4
*4 UPLAP0100XOHR的前代型号
图像来源: Kazuya Tsujita, Ph.D., Toshiki Itoh, Ph.D., Biosignal Research Center, Organization of Advanced Science and Technology, Kobe University Reference: Nat Cell Biol. 2015 Jun; 17 (6): 749–58. doi: 10.1038/ ncb3162.
单分子荧光成像,计数跨膜离子通道复合体的亚单位(APON100XHOTIRF)
得益于1.70的数值孔径,该物镜使得单分子TIRF成像分辨率更高,图像更明亮。
亚单位计数*5 该技术用于分析Kv4.2-DPP10复合物中辅助二肽基肽酶样蛋白10(DPP10)分子的数量,该分子可联结到跨膜离子通道Kv4.2。APON100XHOTIRE物镜的高NA值,使得研究人员能够测量由单分子漂白导致的荧光强度变化。本次研究*6 显示,DPP10亚单位中最多4个分子形成具有离子通道Kv4.2的复合物。
*5 Ulbrich, MH, and Isacoff EY. “Subunit counting in membrane–bound proteins.” Nature Methods, 4 (2007): 319–321.
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*6 Kitazawa M, Kubo Y, and Nakajo K. “Kv4.2 and accessory dipeptidyl peptidase–like protein 10 (DPP10) subunit preferentially form a 4:2 (Kv4.2:DPP10) channel complex.” J Biol Chem, 290 (2015): 22724–22733.
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TIRF物镜选择指南
*3 通过目镜可观察到的最大场数。
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IXplore TIRF
- 利用奥林巴斯实时控制器,在活细胞相关实验中可减少光毒性和细胞损伤
- 可灵活搭载多种活细胞培养系统,成像时依然保持细胞活力
- 采用奥林巴斯硬件自动对焦系统(Z轴漂移补偿),在长时程实验中可精确稳定地锁住焦面
- 奥林巴斯硅油物镜,有助于标本深层成像,避免发生形变
*标识图像:提供方: Dr. Michael W. Davidson The Florida State University