Visualización de agujas de pino con imágenes multimodales: del campo claro a la fluorescencia
Sección de 200 µm de aguja de pino capturada utilizando el escáner de portaobjetos SLIDEVIEW VS200 con el objetivo UPLXAPO 10X (NA 0,40).
Por mantener su color verde durante todo el año, los árboles de follaje perenne son objeto de celebración en todas las culturas desde hace mucho tiempo como símbolos perdurables de vida, esperanza y resiliencia. Este potente simbolismo sigue vigente en la actualidad, y los pinos suelen elegirse como decoración durante las fiestas por su verdor vibrante y duradero.
Más allá de su papel en la decoración navideña y estacional, las agujas de pino también son estructuras biológicas fascinantes. Gracias a sus propiedades anatómicas y autofluorescencia natural, constituyen una muestra ideal para demostrar las capacidades multimodales del escáner de portaobjetos universal SLIDEVIEW™ VS200.
Utilizando una sección de aguja de pino de 200 µm, demostramos cómo este escáner, equipado con el nuevo adaptador de lámpara dual, facilita la obtención de imágenes multimodales al integrar fuentes de luz LED y láser.
¿Qué son las imágenes multimodales?
La microscopía multimodal combina múltiples técnicas de adquisición de imágenes dentro de un solo instrumento para proporcionar información integral y complementaria sobre muestras biológicas a nivel microscópico. Mediante la integración de métodos como la microscopía de fluorescencia con polarización, los investigadores pueden captar simultáneamente propiedades estructurales, químicas y funcionales de células y tejidos, imposibles de observar con una sola técnica.
La adquisición de imágenes multimodales es particularmente valiosa en campos como la neurociencia, la investigación oncológica y la biología del desarrollo, donde la comprensión de fenómenos biológicos complejos requiere la visualización de múltiples marcadores, el seguimiento de interacciones celulares en tiempo real y el examen de muestras en diversas escalas y dimensiones.
Figura 1. Imagen multimodal de enfoque extendido de una sección de 200 µm de aguja de pino utilizando el escáner de portaobjetos SLIDEVIEW VS200 con el objetivo UPLXAPO 10X (NA 0,40). Imágenes por cortesía de Alec DeGrand.
Hallazgos multimodales en una sección transversal de una aguja de pino
Las hojas de las agujas de pino son equifaciales, lo que significa que tienen estructuras anatómicas idénticas en ambos lados y pueden realizar la fotosíntesis en ambas superficies.1 Utilizando imágenes multimodales en el escáner de portaobjetos VS200 (figura 1), capturamos las siguientes características:
- El campo claro revela claramente las diferentes partes anatómicas.
- La polarización destaca los cristales en los haces vasculares, especialmente en el xilema, donde tiene lugar el transporte de agua.
- El campo oscuro muestra un canal de resina vacío a la derecha. Cuando se combina con campo claro y polarización, la morfología del canal se ve menos circular, con células circundantes más redondeadas y organizadas de manera más laxa.
- La fluorescencia resalta la cutícula, pero la sección de la planta es gruesa, por lo que los diferentes canales de fluorescencia (DAPI, FITC, TRITC, CY5 y CY7) se ven borrosos y es difícil reconocer células individuales con fluorescencia de campo amplio. Sin embargo, al utilizar la iluminación por moteado VS-SILA, la autofluorescencia se localiza claramente en las partes superior o inferior de las células, y las membranas celulares son fáciles de reconocer. Los estomas y las células oclusivas, que regulan el intercambio de gases y la pérdida de agua 2, también son visibles (figura 2).
Figura 2. Estomas en una sección de aguja de pino. Imagen de enfoque extendido (EFI) utilizando el objetivo UPLXAPO 40X (NA 0,95). Canales FITC y TRITC con el dispositivo de seccionamiento óptico VS-SILA para el escáner de portaobjetos SLIDEVIEW VS200. Las células oclusivas y los estomas son claramente visibles.
Una mirada más profunda a las estructuras familiares
Las agujas de pino, a menudo pasadas por alto, revelan un mundo de complejidad estructural en las imágenes multimodales. El escáner de portaobjetos SLIDEVIEW VS200 permite a los investigadores descubrir detalles que permanecen ocultos en las observaciones monomodales. Cada modalidad de imagen ofrece ventajas únicas y, al combinarlas, se pueden obtener datos más completos y exactos.
El escáner VS200 ofrece una amplia gama de modalidades de imagen en un solo sistema. Los usuarios pueden aplicar las modalidades de campo claro, campo claro reflejado, contraste de fase, campo oscuro, polarización lineal, polarización circular*, fluorescencia y VS-SILA sin cambiar de instrumento. Ahora, el sistema incluye un adaptador de doble lámpara, lo que permite una iluminación LED y láser combinada y sincronizada para obtener imágenes uniformes y de alta intensidad. Ya sea que esté estudiando señales de fluorescencia fina o estructuras de tejido denso, el VS200 ofrece la claridad y versatilidad necesarias para la investigación avanzada.
¿Está listo para llevar sus imágenes al siguiente nivel? Contáctenos hoy mismo para programar una demostración y conocer cómo el escáner de portaobjetos SLIDEVIEW VS200 puede contribuir a su investigación.
* La disponibilidad puede variar según la región. Comuníquese con su representante local de Evident para obtener más información.
Referencias
1. Wanner, G. 2004. Mikroskopisch-Botanisches Praktikum. Stuttgart: Georg Thieme Verlag.
2. Sitte, P. et al. 1998. Strasburger Lehrbuch der Botanik für Hochschulen. 33rd ed. Gustav Fischer Verlag.
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