Detector SilVIR-RAY

Superresolución rápida y multicolor. Basado en la tecnología SilVIR.

El detector de superresolución SilVIR-RAY™ amplía la probada tecnología de detectores SilVIR™ de Evident al ámbito de la microscopía de barrido de imágenes. Su matriz de detectores SilVIR combina la superresolución con una detección de bajo ruido y alto rango dinámico, lo que permite obtener imágenes multicolores rápidas y simultáneas en el microscopio confocal y de barrido láser multifotónico FLUOVIEW™ FV5000.

  • Product Status: Solo para uso en investigación. No apto para procedimientos de diagnóstico.

Detector SilVIR-RAY

Superresolución multicolor diseñada para la velocidad

Los detectores de superresolución SilVIR-RAY™ incorporan la tecnología SilVIR™ en una matriz diseñada para la microscopía de barrido de imágenes (ISM). Al capturar información espacial que la detección confocal convencional no recoge, los detectores SilVIR-RAY permiten obtener imágenes de superresolución rápidas y sensibles, al tiempo que conservan el amplio rango dinámico y el bajo nivel de ruido por los que se caracteriza la familia de detectores SilVIR.

Disponibles en los microscopios de barrido láser confocales FLUOVIEW™ FV5000 y multifotónicos FV5000MPE, los detectores SilVIR-RAY convierten la obtención de imágenes de superresolución, que antes era una adquisición ocasional y cuidadosamente preparada, en algo que puede utilizar como parte de su flujo de trabajo diario, incluso en muestras vivas y sensibles a la luz.

Corte del cerebro de ratón, región CA1 del hipocampo. Neuronas marcadas con AAV mediante inmunofluorescencia de GFP y VGAT. Imagen de 8K obtenida con un objetivo de inmersión en aceite de 25X (1,00 NA, WD 1,0). Muestra cedida por: los doctores Hirotaka Asai y Shigeo Okabe, del Laboratorio de Imagen de Dinámica Neural del Centro RIKEN para las Ciencias del Cerebro (CBS).

Explore la tecnología

Nueve elementos de detección SilVIR. Una imagen de superresolución.

SilVIR-RAY reconstruye una imagen de superresolución en tres pasos:

1. Recoge luz y detalles al mismo tiempo

Un estopón confocal convencional equilibra la captación de luz con la resolución: ábralo para captar más luz o ciérrelo para obtener detalles más precisos. La matriz de fotomultiplicadores de silicio (SiPM) del detector SilVIR-RAY hace ambas cosas: múltiples subestopones conservan el detalle, mientras que, en conjunto, captan la luz de una apertura completa de una unidad de Airy. Esto es lo que se conoce como microscopía de barrido de imagen (ISM).

2. Reensambla en tiempo real

Cada elemento del detector registra una vista ligeramente desplazada de la misma fuente puntual. La reasignación de píxeles mediante línea de retardo, patentada por el detector SilVIR-RAY, compensa electrónicamente estos desplazamientos en tiempo real antes de que se almacenen los datos de la imagen, de modo que se obtiene una superresolución en directo, de alta velocidad y de hasta 4 colores sin saturar su ordenador con datos .

3. Revela los detalles más sutiles

El algoritmo TruSight™ SR de Evident maximiza el detalle capturado por el sistema óptico, proporcionando imágenes nítidas y de alto contraste mediante una restauración avanzada de la imagen. La deconvolución de TruSight™ aplica un procesamiento iterativo para revelar detalles estructurales aún más finos, lo que permite resoluciones de hasta 80 nm en XY y 200 nm en Z. El amplio rango dinámico del detector SilVIR-RAY garantiza que dichos detalles permanezcan visibles tanto en señales brillantes como en señales tenues en una misma adquisición.

Basado en la tecnología de detectores SilVIR

Lo que hace que la arquitectura « » de la matriz « » sea especialmente eficaz es la tecnología de detección que hay detrás de cada elemento. Cada elemento de la matriz es un detector SilVIR, que combina un bajo nivel de ruido con un amplio rango dinámico, una mayor sensibilidad y una capacidad mejorada de resolución de fotones en toda la matriz.

Imágenes cuantitativas en un amplio rango dinámico

Los datos de imagen se presentan como número de fotones, lo que proporciona el valor absoluto de la intensidad de fluorescencia para cada imagen. El rango dinámico más amplio permite una cuantificación precisa de la intensidad de fluorescencia por número de fotones, incluso a niveles de intensidad elevados.

Detección de bajo ruido

Conserve las señales de fluorescencia débiles de las que depende la exigente obtención de imágenes de superresolución.

Detección consistente

La tecnología SilVIR, basada en semiconductores, garantiza unas características de detección estables entre mediciones, usuarios y momentos temporales.

Más información sobre la tecnología del detector SilVIR

Superresolución para la obtención de imágenes dinámicas

Los detectores SilVIR-RAY realizan una reasignación espacial a medida que se adquiere la señal, lo que evita la necesidad de generar y almacenar múltiples imágenes de detector independientes para cada fotograma con superresolución. Esto reduce la carga de procesamiento de datos y permite obtener imágenes de superresolución con los modos de barrido rápido del FV5000.

Detrás de esta capacidad se encuentra la reasignación de píxeles mediante línea de retardo, que realiza la corrección espacial en la fase de la señal eléctrica, en lugar de reconstruir la imagen posteriormente a partir de nueve imágenes almacenadas por separado.

https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/mis/fv5000/videos/product-page/(3D)92-11DNL_YFP-H_100XOHR_12fps.mp4

Representación volumétrica 3D de alta resolución de las dendritas apicales a partir de un corte cerebral de un ratón de la línea H Thy1-YFP, en la que se visualizan claramente las cabezas de las espinas dendríticas. Objetivo: UPLAPO100XOHR (100X en aceite, NA 1,50). Muestra cedida por: el Dr. Tetsushi Hoshida y el Prof. Atsushi Miyawaki, del Centro RIKEN para las Ciencias del Cerebro (CBS).

https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/mis/silvir-detector/videos/Simultaneous_cos7_2%20colors%20SR_pos4_TSSR0.2_0001_Tstamp_scale5um_00000.mp4

La adquisición simultánea preserva tanto la fidelidad temporal como la verdadera relación espacial entre las estructuras. Células COS-7 marcadas con β-tubulina-mStayGold (microtúbulos) y EB1-mScarlet, que muestran la localización de las proteínas en la periferia celular. Cortesía de Yasushi Okada, Universidad de Tokio.

Visualización de múltiples objetivos al mismo tiempo

Hasta cuatro unidades de detección SilVIR-RAY pueden funcionar simultáneamente en una única plataforma FV5000, lo que permite la adquisición simultánea multicolor de superresolución. Los diferentes canales de fluorescencia se capturan al mismo tiempo, evitando el desfase temporal propio de la adquisición secuencial.

La reasignación de píxeles mediante línea de retardo hace que esto sea factible al consolidar la señal de cada matriz de detectores en una única imagen a medida que se adquiere, lo que reduce el volumen de datos que, de otro modo, generarían múltiples matrices de detectores.

Superresolución que conserva las relaciones entre señales

Las imágenes con una resolución superior, solo resulta útil si puede confiar en ella. Las imágenes con superresolución del detector SilVIR-RAY se reconstruyen mediante el algoritmo TruSight™ SR de Evident, un marco de procesamiento de imágenes lineal ampliado para ser compatible con ISM.

Tanto el procesamiento subyacente como la respuesta del detector SilVIR-RAY son lineales, por lo que la imagen reconstruida sigue siendo proporcional a la señal de fluorescencia de su muestra.

El resultado son imágenes que no solo son visualmente más nítidas, sino que también tienen un significado cuantitativo.

TruSight SR también le permite ajustar continuamente la intensidad del procesamiento para adaptarla a la relación señal-ruido de su imagen, de modo que no sea necesario sacrificar los datos de células vivas con señal débil para obtener una imagen más nítida.

Más información sobre la tecnología TruSight SR

Para aplicaciones que requieran detalles estructurales aún más precisos, se puede aplicar además la deconvolución TruSight de Evident, un procesamiento de imágenes no lineal basado en un algoritmo de iteración restringida. En mediciones representativas, los detectores SilVIR-RAY, combinados con la deconvolución TruSight, han alcanzado una resolución de aproximadamente 80 nm (medida en una microesfera fluorescente de 23 nm —FWHM—). Esta nitidez es suficiente para distinguir marcas individuales en una nanorégla con una separación de tan solo 90 nm.

Imágenes de S , ilVIR-RAY y TruSight de una nanorégla que muestran una capacidad de resolución de 91 nm.

De las estructuras finas a los procesos dinámicos

Arbolado dendrítico captado a alta velocidad sin pérdida de detalle estructural. Se han capturado el soma y los procesos de ramificación en un rango de profundidad de 80 μm con pasos Z de 0,1 μm, utilizando un objetivo de 100X (UPLXAPO100XO) en modo de barrido resonante 2K con acumulación de 10x, lo que demuestra que el barrido resonante conserva la fidelidad de las estructuras finas incluso en campos de visión amplios y con gran densidad de información.

Explore la tecnología que hay detrás de SilVIR-RAY

Profundice en la matriz « », la arquitectura del detector « », la reasignación de píxeles mediante línea de retardo, las características de detección de SilVIR, el procesamiento de superresolución y la validación del rendimiento.

FLUOVIEW FV5000

SilVIR-RAY en el FLUOVIEW FV5000

Los detectores SilVIR-RAY se integran en la plataforma FLUOVIEW FV5000, combinando la detección de superresolución con las capacidades de imagen confocal, escaneo, automatización y flujo de trabajo del sistema. Se pueden instalar hasta cuatro unidades de detección SilVIR-RAY en un único sistema FV5000, junto con sus canales de detector SilVIR estándar.

Descubra el FLUOVIEW FV5000

El microscopio confocal y de barrido láser multifotónico FLUOVIEW FV5000.

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