Notas de aplicación
Mapeo de las células de la válvula aórtica con el microscopio FLUOVIEW FV3000
Las válvulas de un corazón adulto sano permiten que la sangre fluya a los pulmones y a todo el cuerpo. Sin embargo, la estructura y la función de la válvula aórtica son vulnerables al estrés ambiental. Comprender la composición celular de la válvula aórtica es fundamental para el tratamiento de las enfermedades asociadas, como la calcificación de la válvula aórtica bicúspide y la degradación de las aletas.
Gracias al uso del microscopio confocal FLUOVIEW FV3000, se pudo confirmar con éxito la contribución de las células positivas Tie2 en la válvula aórtica mediante una identificación tecnológica de rastreo de linaje.
Fácil procesamiento de imágenes macro a micro de células de válvula aórtica de roedor
Gracias al objetivo dedicado al procesamiento de imágenes macrométrico de 1,25X, se pudo adquirir de forma fácil y rápida una amplia visión panorámica de un seccionamiento de válvula aórtica en una sola imagen. Con sólo arrastrar el ratón sobre la imagen de visión panorámica, la función macro a micro del microscopio confocal FV3000 permitió localizar rápidamente las células objetivo y, a continuación, observar las estructuras finas en una región de interés utilizando una lente de objetivo de alta resolución.
Video: Vista panorámica macro a micro del patrón de expresión de las células Tie2 en la válvula aórtica de un ratón. Las células positivas de Tie2 están etiquetadas con EGFP (verde), y las células no endoteliales están etiquetadas con td Tomato (rojo).
Equipamiento de microscopía para el procesamiento de imágenes:
Microscopio confocal FV3000 con una platina motorizada
Objetivo: Objetivo de 1.25X, 10X y 40X (PLAPON1.25X, UPLSAPO10X2 y UPLSAPO40X2).
¿Cómo el microscopio confocal FV3000 favoreció a nuestro experimento?
Observación macro a micro
La función macro a micro del FV3000 proporciona una guía de la adquisición de datos para que pueda ver los datos en contexto y localizar fácilmente regiones de interés para procesamiento de imágenes de resolución superior.
Extensa gama de objetivos Olympus
Olympus ofrece un amplio rango de objetivos. La trayectoria óptica de luz del FV3000 soporta objetivos desde 1,25X hasta 150X y permite adquirir imágenes de muestras desde tejidos grandes hasta pequeños organismos.
Agradecimientos
Esta nota de aplicación fue preparada con la ayuda de la Dra. Wenli Fan, del Laboratorio estatal principal de biotecnología farmacéutica [State Key Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology], Departamento de cardiología, Hospital de la Torre del Tambor [Drum Tower] de Nanjing Drum y Hospital Afiliado de la Universidad de Nanjing.
Referencias
- Feng, Q. et al. PDK1 regulates vascular remodeling and promotes epithelial-mesenchymal transition in cardiac development. [PDK1 regula el remodelado vascular y promueve la transición epitelial-mesenquimal en el desarrollo cardíaco]. Mol Cell Biol 30, 3711-3721, doi:10.1128/MCB.00420-10 (2010).
- Di, R., Yang, Z., Xu, P., y Xu, Y. Silencing PDK1 limits hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension in mice via the Akt/p70S6K signaling pathway. [Acallar el PDK1 limita la hipertensión arterial pulmonar inducida por la hipoxia en ratones a través de la vía de señalización Akt/p70S6K]. Exp Ther Med 18, 699-704, doi:10.3892/etm.2019.7627 (2019).
Productos usados para esta aplicación
FV5000
Microscopio confocal de escaneo láser
- Claridad, velocidad y fiabilidad extraordinarias impulsadas por innovaciones revolucionarias.
- Los detectores SilVIR™ ofrecen cuantificación a nivel de fotones, sensibilidad excepcional y una relación señal/ruido ultra alta.
- Su rango dinámico inigualable captura todo el espectro de la señal y evita la saturación.
- Escaneo resonante 2K de alta velocidad y escaneo galvo 8K de alta densidad en una sola plataforma
- El software FLUOVIEW Smart™ simplifica el funcionamiento con controles intuitivos y automatización basada en IA
- El collar de autocorrección TruResolution™ optimiza el enfoque para más de 20 objetivos.
- El diseño modular admite hasta 10 líneas láser y futuras actualizaciones multifotónicas.
- Laser Power Monitor (LPM) garantiza una iluminación estable y resultados reproducibles a lo largo del tiempo.
FV5000MPE
Microscopio multifotónico de escaneo láser
- Los láseres compactos acoplados a fibra óptica permiten obtener imágenes cuantitativas profundas en tejidos dispersores.
- Excitación láser MPE simultánea de una, dos o tres líneas para imágenes de milímetros de profundidad.
- Las tecnologías SilVIR™, TruAI y TruSight™ ofrecen una relación señal/ruido y una claridad excepcionales.
- Objetivos optimizados para MPE, collar de autocorrección TruResolution™ y alineación automatizada del láser IR mantienen un enfoque nítido.
- Disponible como actualización para el sistema FV5000 o como sistema MPE completo
- Configuraciones láser totalmente ajustables disponibles para aplicaciones multifotónicas avanzadas.
FV4000
Confocal Laser Scanning Microscope
- Rango dinámico revolucionario para el procesamiento de imágenes desde la macroescala hasta las estructuras subcelulares.
- Multiplexación de hasta seis canales simultáneamente con la tecnología TruSpectral
- Rediseño de los escáneres con alta velocidad y resolución para el procesamiento de imágenes fijas y de células vivas
- Optimización de la profundidad y la fotosensibilidad con funciones innovadoras del infrarrojo cercano (NIR) y óptica de renombre
- Tranquilidad gracias al detector fiable y de disparo repetible SilVIR.
- Diez líneas de láser líderes de la industria * con un rango espectral más amplio de 405 nm a 785 nm
*Desde octubre de 2023.
PLAPON
Objetivos macro apocromáticos
Con el fin de ofrecer una observación macro de alto rendimiento, estos objetivos apocromáticos proporcionan imágenes nítidas, claras y planas sin alteraciones de color, lo que resulta en una alta transmisión hasta el área espectral del infrarrojo cercano. Su rendimiento es adecuado con los métodos de observación de fluorescencia, campo claro y de interferencia diferencial (DIC) Nomarski
- Visualización de imágenes planas desde altos factores de transmisión hasta el área espectral del infrarrojo cercano
- Adquisición de imágenes nítidas y claras, sin alteraciones de color, a través de observaciones con fluorescencia, campo claro y DIC Nomarski
- Solución inigualable para cualquier necesidad de calidad y rendimiento en el procesamiento de imágenes digitales