FLUOVIEW FV4000共聚焦激光扫描显微镜
使用新型FLUOVIEW FV4000共焦激光扫描显微镜为您的成像带来突破性变革。先进的成像技术可实现更高精度的图像,从而使研究人员能够从样品中获得更可靠的数据。以突破性的SilVIR探测器作为系统的核心,可以实现更少的噪点、更高的灵敏度和更强的光子分辨能力。使用FV4000共聚焦显微镜,研究人员可以在更短的时间内、更轻松地获取更高质量的定量图像数据。
- Product Status: 本产品和早期的FV系列系统已被FV5000取代。
FV4000 激光扫描共聚焦显微镜
精准量化的成像变革
我们凭借超过100年的光学专业知识打造了FV4000显微镜,这款显微镜是一项技术突破,可提供卓越的图像质量,且潜力巨大,可让您观察到前所未见的细节,增强您的研究能力。
- 采用我们的超低噪声SilVIR探测器和业界领先的六通道、十条激光线和400–900 nm动态范围,获得 卓越的图像质量。*
- 获取共聚焦图像的速度比FV3000 快达60倍,获取超分辨率图像的速度比FV3000 快达8倍。
- 为每个像素中的光子计数,并将特征表示为在不同波长下捕捉到的光子的离散直方图。
- 改变了游戏规则的动态范围 可使您进行从几个光子到数千个光子的线性计数。
- 易于使用,只需进行少量调整,即可获得高影响力的图像和数据。
*截至2023年10月。
“探测器的动态范围大,易于设置。它们可以处理低信号,但不会关闭,并且在高信号下表现良好。这使得显微镜的设置非常方便。其光子计数模式也是一项备受赞赏的功能。FV4000显微镜精准度高、调节简单、灵活性强,适合不同经验水平的用户和不同复杂程度的成像实验,是成像实验室中非常有价值的工具。”
—Johannes Riemann,苏黎世大学显微镜和图像分析中心
轻松获取可定量的共聚焦数据
FV4000共焦显微镜采用先进的硅基SilVIR探测器,比以往任何时候都更容易获取精准、可再现的数据。
SilVIR下一代探测器技术
SilVIR探测器结合了两项先进技术:硅光电倍增管(SiPM)和我们已获专利的*快速信号处理设计。
- 高动态范围
- 低噪声
- 灵敏度不易衰减
- 与其他探测器相比,灵敏度差异较小
*专利号US11237047
绿色为神经丝重链(NFH),红色为髓鞘碱性蛋白(MBP),蓝色为谷胱甘肽S-转移酶pi 1 (GSTpi)。用UPLXAPO40X物镜捕获的小鼠小脑。
图像承蒙科罗拉多州奥罗拉市科罗拉多大学安舒茨(Anschutz)医学校区神经生物学首席研究员
使用SilVIR探测器捕获的图像上的直方图显示了一种离散模式,其中强度可以转换为光子数。探测器的荧光强度可量化为光子数,且背景噪声水平很低。
该系统及其性能给我留下了深刻的印象。其超高灵敏度确实令人印象深刻。”
—Sara R. Roig,巴塞尔大学高级显微镜专家
从共聚焦图像中获取更多信息
系统更新后的TruSpectral技术与高灵敏度SilVIR探测器相结合,可同时进行多达六个通道的多色成像,让您看到更多信息。
小鼠海马体的神经血管单元。蓝色;DAPI细胞核,绿色;GFAP AF488。 星形胶质细胞,黄色;DsRed 周细胞,洋红色;血管胶原蛋白IV AF647基底膜,灰色;AQ-4。星形胶质细胞水通道。
样品承蒙以下人员和机构提供:日本理研CBS细胞功能动力学部Hiroshi Hame和Atsushi Miyawaki。
细胞骨架样品:用DAPI(蓝色)、中心粒周蛋白(中心体,绿色)、a-微管蛋白(微管,Alexa-568;红色)和鬼笔环肽(肌动蛋白,Alexa-647;洋红色)染色的人宫颈癌传代细胞。
样品承蒙以下人员和机构提供:样品制备 Alexia Ferrand;样品采集 Sara R。Roig和Alexia Ferrand采集,巴塞尔大学生物中心成像核心设施。
轻松适应不断变化的研究需求
我们的FV应用是适用于FV4000显微镜的独特解决方案,具有出色的价值和灵活性。
- 自动宏观到微观成像:以低放大倍率在微孔板中找到球体/类器官,然后再换成高放大倍率获取三维细节。
- 显微镜性能监视器:轻松测量和跟踪系统的性能、设置和测量结果,提高了实验的可追溯性和可重复性。
- 阶段跟踪:精准控制位置,即使样品在移动,也能将其保持在图像中心。
- NoviSight软件:为您的工作流程添加强大的三维细胞分析功能,对细胞活动进行三维量化,更轻松地捕捉罕见细胞事件,获得准确的细胞计数,提高检测灵敏度。
果蝇翅膀(42小时蛹期)的全景和边缘图像。用鬼笔环肽(AlexaFluor 405,F-肌动蛋白,青色)、抗磷酸酪氨酸抗体(AlexaFluor 555,细胞表面,红色)和抗HRP抗体(AlexaFluor 647,轴突,蓝色)染色。样品承蒙以下人员和机构提供:日本理化学研究所(RIKEN)生物系统动力学研究中心形态发生信号实验室的Sun Zhengkuan、Shigeo Hayashi。
更温和的高速延时共聚焦成像
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用MitoView 720标记的人宫颈癌传代细胞。通过1K共振扫描振镜进行的30分钟XYZT成像。
智能功能让延时成像更轻松:
- 捕获活细胞动态变化过程的每一个瞬间:共振扫描振镜可在大视野范围内获取高分辨率图像
- 更小的光毒性:扫描单元的像素停留时间短,减少了聚焦激光束停留在单个聚焦点上的时间
- 信噪比更高:SilVIR探测器的高灵敏度能以更高的速度生成更高质量的图像
- 精度更高:循环平均降噪可保持时间分辨率
不同用户和系统之间的图像数据具有可再现性
与上一代探测器技术相比,SilVIR探测器随时间推移而衰减的灵敏度更少。借助我们的激光功率监控器(LPM)和TruFocus Z轴漂移补偿系统,可在一致的条件下获得可再现的图像,从而提高了再现性。不同用户在不同日期可以使用相同的设置获取同等精准的图像。即使是不同FV4000显微镜采集的图像,也可以使用相同的光子数强度指标进行比较和讨论。
为了进一步提高可重复性,显微镜性能监视器可以轻松检查系统的激光功率、检测灵敏度和光学性能,有助于确保FV4000显微镜以稳定的高水平运行。
推动高端成像研究的未来发展
我们设计FV4000显微镜的初衷是让每个使用它的人都受益,包括核心实验室的经理和坐在显微镜前进行成像实验的个人用户。
核心实验室的经理
- 每天都能稳定运行:我们的SilVIR探测器的性能不会随着时间的推移而下降,因此可长时间的正常运行,而不会出现常见的性能下降。
- 高性能、低维护:用户可以快速捕捉定量性且可重复的优质图像,同时激光功率监控器和显微镜性能监控器可让管理人员对系统进行更深入的了解和控制。
- 行业领先的功能和可升级性可为您的实验室提供未来保障:10条激光线、6个通道、400至900 nm的动态范围,以及在同一系统上轻松升级到MPE的能力,使这款显微镜能够满足您现在和未来的需求。
- 快速掌握,易于使用:由于SilVIR探测器易于调整,用户只需花很少的时间就能掌握如何确认自己的设置。
PI和小组负责人
- 突破性技术:显微镜结合了独特、创新的功能,有助您捕捉到会令同事感到惊讶的图像和数据。
- 量化荧光信号:我们的SilVIR探测器可以量化每个像素中从几个到数千个光子的数量(即使在高动态范围内)。
- 节省时间:自动化的工作流程让您在实验运行时可以腾出时间做其他事情。
- 出色的支持:我们随时为您解答问题,帮助您充分利用系统。
个人用户
- 快速学习曲线:FV4000打破了复杂共聚焦的模式,新用户只需接受少量培训,即可开始拍摄出版质量的图像。
- 在显微镜前花费更少的时间:显微镜速度快,易于使用,有助于快速高效地进行成像实验,因此用户坐在显微镜前的时间会更少。
- 一次做好,无需重复:显微镜的设置调整更简单,再加上显微镜性能监控器提供的信息,有助于用户在开始成像之前了解系统是否会按预期运行,从而减少了重复实验的需要。
值得信赖的显微镜支持和服务
我们将易维护作为FV4000系统的设计宗旨:
- 基于半导体的SilVIR探测器稳定耐用
- 激光功率监控器会持续检查照明条件并进行调整,以保持一致的激光功率
- 系统管理员可以查看日志文件,以跟踪服务维护计划
我们承诺提供快速服务和技术支持,为我们的产品保驾护航。我们提供各种支持计划,让您的显微镜以可预测的成本保持高性能运行,同时还提供远程支持选项,因此如果您遇到问题,无需等待工程师或专家上门服务。
“与我使用过的其他共聚焦系统相比,你们的系统使用起来毫无压力(不用担心破坏样品,也不会对软件/一般操作感到不知所措),用户只需稍作调整,就能生成高质量的数据,而不会觉得自己的选择受到了限制。”
—Sanni Erämies,坦佩雷大学/坦佩雷核心实验室成像部门
应用技术
采用近红外技术的共聚焦显微镜看得更清楚
近红外(NIR)成像技术完全集成到FV4000中,所有探测器都在近红外范围内运行,因此可以充分发挥这种成像技术的优势:
- 穿透到组织的更深处:近红外光在生物组织中穿透更深,散射更少,可对表面下的深层结构进行成像。
- 使细胞更健康:由于近红外光的能量低于可见光,因此可降低生物样品受到光损伤和光漂白的风险。
- 更轻松地进行复杂多色成像:利用近红外(NIR)荧光探针,大幅提高系统的六个光谱探测器的性能,同时大幅减少重叠。
- 更好的对比度和清晰度:近红外范围内的自发荧光较少,从而可产生对比度更高的图像。
- 业内领先的规格推动前沿研究的发展:我们的高效体积相位全息图(VPH)光栅和狭缝能以最小1 nm的步长检测400 nm至900 nm的波长范围,而激光组合器可并行使用最多10条从405 nm到785 nm的激光线。*
*截至2023年3月。
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用6种荧光色素标记的人宫颈癌传代细胞。
细胞核(DAPI;蓝色)、细胞膜(AF488;绿色)、核孔(AF561;黄色)、
微管(Qdot605;洋红色)、线粒体(MitoTracker DeepRed;青色)、肌动蛋白(AF750 鬼笔环肽;灰色)。
获奖技术促进获奖研究
FV4000系统的光学元件在400 nm至1300 nm范围内具有高透过率,包括镀银而非镀铝的常规扫描振镜和共振扫描振镜。
我们屡获殊荣的X Line物镜可校正400至1000 nm范围的色差。它们还具有更高的数值孔径、出色的平场性,以及从紫外到近红外的高透射率,从而提高了多色成像能力。
为了提高共定位的可靠性,我们的专用A Line (PLAPON60XOSC2)油浸物镜(ne~1.40)可明显减少色差,以便进行严格的共定位分析。
图像质量更高,速度比FV3000快60倍
独特的先进技术组合能以比传统激光扫描显微镜系统更快的速度生成高质量图像。
- 高速捕获高分辨率图像:FN20下每像素0.033 µs的1K × 1K共振扫描振镜和SilVIR探测器使您能够快速采集噪点很少的图像
- 质量出色的宏观图像:快速采集具有卓越质量的拼接宏观图像,从而最大限度地利用您的时间和提升研究潜力
“它与人工智能还原工具完美结合,可实现快速、高质量的体积成像。”
—Edwin Hernandez,卡哈尔国际神经科学中心(CINC)核心实验室经理
超分辨率成像速度提高了8倍*
使用FV4000显微镜轻松捕获超分辨率图像。
- 轻松:使用我们的A Line HR物镜和超分辨率软件(FV-OSR)可观察亚细胞结构。
- 详细:软件可自动优化共聚焦孔径,以检测高频成分,并增强对比度,分辨率可达120 nm。
- 快速:得益于SilVIR探测器的超低噪音,获取超分辨率图像的速度比上一代系统快了8倍。
*与FV3000相比。
共焦模式1AU(第一的)与超分辨率模式(第二)的对比
利用高分辨率3D成像技术进行更深入的观察
用DAPI(青色,细胞核)和AlexaFluor790(洋红色,Ki-67)标记的人宫颈癌传代细胞球。使用405 nm激光只能对表面区域的细胞核进行观察,但使用近红外785 nm可以对细胞球的整个体积进行成像。
在对较厚样品进行成像时,FV4000显微镜可使您捕获高分辨率的3D图像。
- 得益于SilVIR探测器的宽动态范围和灵敏度,可以利用近红外更长的波长穿透到组织更深层
- 光散射化合物(如黑色素和血红素)在700至1500 nm波长范围吸光度较少,近红外成像可以减少散射和吸收来增加成像深度
- 得益于FV4000上的685 nm、730 nm和785二极管激光器,成像深度远超可见光激光器的水平
- 高NA硅油物镜可尽量减少球面像差,硅油也不会变干,两者都是延时成像的有利条件
- 使用TruSight反卷积技术可提高整体图像质量和Z轴分辨率,从而获得出色的厚样品3D图像
- 利用专门的cellSens软件算法,尽享从采集到出版的无缝工作流程
通常,在较短时间内使用较长波长进行荧光激发更有利于样品的整体健康。使用光毒性较小的光意味着可以进行更长时间的成像,从而可从活细胞成像实验中获得更一致、可再现性更高的数据。
FV4000系统不仅能通过685 nm、730 nm和785 nm激光器提供温和的延时成像,还配备了专用的TruFocus Red Z轴漂移补偿系统,以保持焦点位置。这款升级版TruFocus Red装置支持更大的波长范围,可与各种物镜兼容,包括我们的高性能X Line和A Line系列。
“新型FV4000成像速度更快,可以更好地保存样品……并且可重复性更高。”
—巴塞尔大学高级显微镜专家Alexia Ferrand
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延时光刺激:对C2C12细胞进行了激光损伤。绿色伪彩色表示使用了FM 1-43浴液。图像使用2 μs普通检流计扫描振镜和UPLSAPO60XOHR物镜拍摄。405 nm激光用于光损伤,488 nm激光用于成像。样品承蒙以下人员和机构提供:国家儿童研究所遗传医学研究中心的Daniel Bittel和Jyoti Jaiswal。
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用Hoechst33342(细胞核,蓝色)、MitoTracker Green(线粒体,绿色)、LysoTracker Red(溶酶体,黄色)、SiR-Tubulin(微管蛋白,洋红色)、POR-SA-Halo(ER,青色)染色的人宫颈癌传代细胞的延时图像。Hoechst33342: Ex 405 nm/Em,MitoTracker Green:LysoTrakcer Red: SiR-Tubulin: POR-SA-Halo: 样品承蒙以下人员和机构提供:日本名古屋大学转化生物分子研究所(WPI-ITbM)的Masayasu Taki博士和日本名古屋大学理科研究生院的Yuichi Asada和Ryusei Aruga。
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用MitoTracker Red(线粒体,洋红色)、POR-SA-Halo(ER,青色)染色的人宫颈癌传代细胞的17小时延时图像。MitoTracker Red: Ex 561nm/Em,POR-SA-Halo: Ex 730nm/Em,样品承蒙以下人员和机构提供:日本名古屋大学转化生物分子研究所(WPI-ITbM)的Masayasu Taki博士和日本名古屋大学理科研究生院的Yuichi Asada和Ryusei Aruga。
清晰的深层图像
将我们的硅油物镜与FV4000显微镜配合使用,可获得样品深处特征和结构的清晰图像。硅油的折射率接近活细胞或组织的折射率,与空气、水或其他油料相比,可大幅降低球差。由于色像差较小,您可以获得样品深处更清晰的图像。而且硅油在37 ℃下不会干燥,因此可有效用于长期延时成像。
适用于共聚焦显微镜的AI解决方案
省时省力地获取令人惊叹、数据丰富的图像
省时省力地获得更优质的图像TruAI降噪技术可将FV4000已经很低的图像噪声降到超低限度,从而获得令人惊叹、数据丰富的共振图像。
为了加快图像分析速度,您可以对人工智能模型进行预训练,这样系统就能自动分割图像数据,从而可大大减少这一往往非常耗时的人工流程的工作量。然后,TruAI技术还可进一步简化分析流程,助力您快速获取数据。
创新技术与卓越成像的完美结合
通过采用TruAI降噪技术可提高共振扫描的图像质量。虽然共振扫描图像能有效地以高速、低损伤方式捕获细胞动态,但这通常会导致信噪比下降。TruAI降噪技术可利用基于SilVIR探测器噪点模式的预训练神经网络,在不牺牲时间分辨率的情况下改善这些图像。这些预训练的TruAI降噪算法可用于即时处理和后处理。
经过TruAI降噪处理(第二)
大脑样品:小鼠大脑的冠状切片(50 μm),用DAPI(细胞核,青色)、GFAP(星形胶质细胞,绿色/488)、MAP2(微管相关蛋白2、神经元和树状突,青色/647)和MBP(髓鞘碱性蛋白,红色/568)染色。样品承蒙以下人员和机构提供:样品制备 Alexia Ferrand; 样品采集 Sara R。 Roig和Alexia Ferrand采集,巴塞尔大学生物中心成像核心设施。
经过TruAI降噪处理(第二)
使用1K共振扫描振镜采集的由MitoView 720标记的人宫颈癌传代细胞线粒体。最大光子数为3个。
更快、更轻松地进行图像分析
图像分析需要使用基于强度阈值的分割技术来提取数据。但这可能是一个耗时的过程,而且会受到样品条件的影响。
使用深度学习的TruAI图像分割有助于简化图像处理,并尽量减少样品变量,从而进行更准确的图像分析。该技术可出色分割荧光非常微弱的图像或组织,而使用简单的阈值法通常很难进行提取。
TruAI探测肾小球特征(第二)
配置
FV4000显微镜采用模块化设计,便于您根据自己的应用和预算配置系统。您可以从购买标准的FV4000开始,然后随着研究的变化,通过添加MPE模块,轻松升级到多光子成像。
一个平台就可满足您的多样研究需求
还可在一个样品中进行多光子和单光子组合成像。FV4000MPE显微镜能够进行二次和三次谐波成像,因此不同的研究人员或用户都可以充分利用该系统。如果您的研究需要自定义设置,显微镜的模块化和可选端口可使您定制系统,以添加额外的激光器、相机、探测器等。
升级至FV4000MPE
选择适合您的应用的配置
倒置显微镜机架
成像型正置显微镜镜架
电生理型正置显微镜镜架
龙门型正置显微镜机架
技术规格
(常规成像)
(高速成像)
资源
应用资料
博客
目录
视频
HeLa cell spheroid labeled by DAPI (cyan, cell nuclei) and AlexaFluor790 (magenta, Ki-67)
HeLa cells labeled by MitoView 720
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IX83 Inverted Microscope: Focusing and Positioning the Stage Using the U-MCZ Remote Controller
FV3000 共聚焦显微镜TruFocus Z轴漂移补偿模块连续锁焦模式使用说明
FV3000共聚焦显微镜TruFocus Z轴漂移补偿模块单次自动对焦模式使用说明
Using the TruFocus™ Z-Drift Compensation Module in Single Shot Mode on the FV3000 Microscope
FLUOVIEW™ FV3000 Microscope: System Shutdown Procedure
IX83 Inverted Microscope: Adding Oil to the Objective
FV31S-SW Layout Function Tutorial
FLUOVIEW™ FV3000 Microscope Basic Start-Up Procedure
FV3000: Flow of fluorescent beads inside blood vessels and tumor spheroids constructed on a microfluidic device
https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/video/video/library/10X-2_512.mp4
FV31S-SW imageprocessing: Spectral Deconvolution
FV31S-SW imageprocessing: Projection, cropping & exporting
FV3000: How TruSpectral Technology Works
TruFocus: Z-Drift Compensator
FV3000:FV3000在癌症研究的应用 Yuji Mishima博士
https://adobeassets.evidentscientific.com/content/dam/video/video/library/iv_en_0520(2)_480.mp4
FV3000: 囊泡跟踪
FV3000: 通过SCALEVIEW-A2透明化的小鼠胰腺
FV3000: 藤原作物
FV3000: 水蚤10x DIC
FV3000: 细胞分裂共振
FV3000: 血流视频